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超分辨显微镜主要依赖荧光标记的样品进行成像
超分辨显微镜主要依赖荧光标记的样品进行成像
更新时间:2026-01-27 点击次数:10
超分辨显微镜
是一种能够突破传统光学显微镜分辨率极限的先进显微技术,以下是其基本工作原理和优点。
1.基于荧光成像:主要依赖荧光标记的样品进行成像。样品中的荧光分子在特定波长的光激发下会发出荧光,通过检测这些荧光信号来获取样品的图像信息。
2.克服衍射极限:传统光学显微镜的分辨率受到光的衍射极限限制,而超分辨显微镜通过各种技术手段巧妙地绕过了这一限制。例如,结构光照明显微术(SIM)利用光的干涉条纹照亮样品,使荧光分子产生高频信息,再通过计算重构获得超分辨图像;受激发射损耗显微镜(STED)则采用一束中心波长为λ的激光聚焦到样品上,同时用另一束波长为λdep的激光包围第一束激光,使周边区域的荧光分子发生受激发射损耗而不发光,只保留中心极小区域内的荧光发射,从而提高分辨率。
3.单分子定位与追踪:一些超分辨技术如单分子定位显微镜(SMLM),通过控制荧光分子的开关状态,实现对单个分子的高精度定位和追踪。多次重复这个过程,就能构建出超分辨的图像。
超分辨显微镜
的使用注意事项:
1.操作规范
-小心操作:在使用显微镜时,要遵循正确的方法,例如在移动仪器时要一只手握镜臂,一只手扶镜座,两上臂紧靠胸壁,切勿用一只手斜提,前后摆动,以防镜头或其他零件跌落。
-距离把控:在观察标本时,显微镜离实验台边缘应保持一定距离,以免显微镜翻倒落地。镜柱与镜臂间的倾斜角度不得超过45度,用完立即还原。
2.环境要求
-稳定放置:显微镜要放在一个平稳的地方,当实验室或实验台的振动太大时,可以用某种稳健的台子来安置显微镜。
-控制温湿度:保持适宜的环境温度和湿度,避免因温湿度变化影响显微镜性能和样品状态。
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